纳米磁分离法结合实时荧光定量PCR检测恶性疟原虫的研究

摘要：

目的：建立恶性疟原虫纳米磁分离实时荧光定量PCR检测方法，快速准确地检测恶性疟原虫，为输入性恶性疟防控提供技术支持。方法根据恶性疟原虫基因组18S rRNA保守区序列，设计并合成引物和探针；构建质粒标准品，拟合标准曲线，采用纳米磁分离法提取核酸，建立恶性疟原虫纳米磁分离实时荧光定量PCR检测法，并进行该方法的灵敏度和特异性评价。结果与常规法（镜检法和快检法）相比，该方法检测恶性疟原虫更加灵敏，并具有良好的特异性，在（2.5×101~2.9×108）copies/ml拷贝数范围内循环阈值（Ct值）与质粒标准品拷贝数的对数值之间存在良好的线性关系（R2=0.999）；应用该方法从非洲维和部队13名归国人员中检出1例低水平恶性疟原虫感染者，而常规法（镜检法和快检法）未检出。结论该方法能够快速准确地检测恶性疟原虫，在口岸低密度恶性疟原虫感染者的检测中具有很大的应用价值。

关键词：恶性疟原虫、输入性、纳米磁分离、实时荧光定量PCR、检测

分类号：R382.31(医学寄生虫学)

资助基金：国家质检总局科研基金2012IK218；国家重大科学研究计划2011CB932803

在线出版日期：2014-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：522-525,530