pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2真核表达载体的构建与鉴定
目的:构建pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2多基因重组表达载体,并对其进行初步鉴定。方法根据重组体pcDNA3-p30-ROP2酶切位点和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因序列等因素设计合成引物,扩增HBsAg目的基因片段,再应用酶切、连接等分子生物学技术将HBsAg目的基因克隆至pcDNA3-p30-ROP2表达载体中。应用聚合酶链反应(PCR)初筛,再采用酶切、测序等技术对构建的重组表达载体pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2进行鉴定。结果 PCR扩增出HBsAg基因片段,构建了pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2多基因真核表达载体。PCR与酶切结果显示,该基因片段大小均与理论值相符;测序结果显示该重组表达载体包含了p30-ROP2和HBsAg目的基因的完整序列。结论成功构建了多基因重组表达载体pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2,为进一步研究多基因核酸疫苗奠定了基础。
弓形虫、表面抗原1(p30)、棒状体分泌抗原2(ROP2)、乙肝表面抗原、基因重组
R382.5(医学寄生虫学)
山东省自然科学基金2009ZRC03083、2009ZRC03050;山东省医药卫生科技发展计划项目2011HW049;山东省济宁市科技计划项目2013jnwk51;山东省医学科学院科技计划2013-01
2014-02-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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