重组日本血吸虫P14蛋白对血吸虫感染小鼠保护性免疫效果

摘要：

目的 探讨重组日本血吸虫P14蛋白(SjP14)对血吸虫感染小鼠的免疫保护效果.方法 构建SjP14原核表达质粒pET28a(+)-SjP14,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达重组蛋白rSjP14,纯化蛋白后,进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting鉴定.将6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为SjP14重组蛋白实验组(A组)、佐剂对照组(B组)、生理盐水对照组(C组),每组10只.每鼠每次注射抗原100 μg,免疫3次,每次间隔2周,末次免疫后2周,血吸虫尾蚴攻击感染.分别于免疫前、免疫后6周和感染后6周经眶静脉采血,分离血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清总IgG、IL-4和IFN-γ.血吸虫尾蚴攻击感染后6周,剖杀小鼠,计算各组的减虫率和肝脏减卵率.结果 SjP14原核表达产物相对分子质量(Mr)约为38 000;rSjP14能被SjPl4多克隆抗体识别.血吸虫尾蚴攻击感染后6周,A组特异性IgG抗体水平升高,为(25.52±1.91)μg/ml,与C组[(18.65±3.16)μg/m1]和B组[(22.44±2.83)μ∥m1]相比差异均有统计学意义(P均＜ 0.05).IFN-γ浓度升高,为(171.30±70.12) ng/L,与C组[(136.89±37.62) ng/L]和B组[(153.64±43.44) ng/L]相比差异均有统计学意义(P均＜ 0.05).A组免疫后6周IL-4先略有升高,感染后6周下降,为(112.05±15.02)ng/L,与C组[(102.82±27.46) ng/L]相比差异有统计学意义(P＜0.05).A组小鼠减虫率和减卵率分别为29.2％和41.3％,与B、C组相比差异均有统计学意义(P均＜ 0.05).结论 SiP14蛋白疫苗具有一定的抗血吸虫感染免疫保护作用.

关键词：日本血吸虫、P14基因、调宁蛋白样蛋白、保护性免疫

所属期刊栏目：25

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金81270091;皖南医学院重点科研项目培育基金WK2012Z08

在线出版日期：2013-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：375-378,410