TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR用于中华按蚊kdr基因突变检测的研究

摘要：

目的 建立一种用于中华按蚊杀虫剂抗性相关kdr基因突变检测的实时荧光定量PCR方法.方法 根据中华按蚊kdr基因序列及其L1014位点常见的突变类型设计一对引物和三条TaqMan-MGB探针,对TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR反应体系和条件进行了优化,选择经测序鉴定后的6种中华按蚊kdr基因常见类型对该方法进行验证,并用该方法对50个实验室和113个现场中华按蚊样本进行检测.结果 实时荧光定量PCR方法能对中华按蚊kdr基因6种不同的基因型进行检测,单管法可判断kdr基因L1014是否发生突变,双管法可对具体突变类型进一步鉴别.经检测,50个实验室样本均为野生型纯合体,而113个现场样本中,仅12个样本为野生型纯合体,其余101个样本均发生了L1014F或L1014C突变,突变频率为87.61％.结论 TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR可用于中华按蚊kdr基因L1014位点突变的检测.

关键词：中华按蚊、kdr基因、基因突变、TaqMan-MGB探针、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：25

分类号：R382.31(医学寄生虫学)

资助基金：江苏省科教兴卫工程高技术平台ZX201108;江苏省特色业务建设项目BM2009902;国家科技重大专项2012ZX10004-220;江苏省卫生厅血地寄科研项目X201131

在线出版日期：2013-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：167-171,176