细粒棘球绦虫烯醇酶基因克隆表达及免疫诊断研究

摘要：

目的 克隆表达细粒棘球绦虫烯醇酶(EgEno)基因,并对其免疫诊断价值进行初步评价.方法 从细粒棘球绦虫cDNA中扩增目的基因,克隆入表达载体pET28a,转化E.coliBL21 (DE3),经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,进行SDS-PAGE和免疫印迹法鉴定；采用细粒棘球蚴病及其他几种寄生虫病患者的血清和健康人血清,通过ELISA法评价重组EgEno抗原的免疫诊断效果.结果 重组质粒pET28a-EgEno构建成功.SDS-PAGE和免疫印迹法结果显示,重组蛋白在E.coliBL21 (DE3)中获得高效表达,重组蛋白EgEno相对分子量约为50 kDa,可被细粒棘球蚴病患者血清识别.EgEno对细粒棘球蚴病患者血清的免疫诊断敏感性为81.25％.结论 克隆出细粒棘球绦虫EgEno基因并在E.coliBL21(DE3)中表达,重组EgEno对细粒棘球蚴病有较好的免疫诊断价值.

关键词：细粒棘球绦虫、EgEno基因、克隆、表达、免疫诊断

所属期刊栏目：24

分类号：R383.3+3(医学寄生虫学)

资助基金：国家重大科技专项2012ZX10004-201,2009ZX10004-201,2008ZX10004-002;国家高技术研究发展计划863计划2006AA02Z444

在线出版日期：2013-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：549-552,556