中国中部地区间日疟原虫分离株Duffy血型结合蛋白Ⅱ区的克隆表达与初步鉴定

摘要：

目的 克隆中国中部地区间日疟原虫分离株Duffy血型结合蛋白Ⅱ区基因(PvDBPⅡ),体外表达和鉴定重组PvDBPⅡ蛋白.方法 PCR法从间日疟患者血液DNA样品中扩增PvDBPⅡ基因,将产物插入到原核表达载体pET28a(+)中,构建pET28a-PvDBPⅡ重组表达质粒,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21 (DE3+),异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导表达带有His标签的重组蛋白,采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,相应表达物分别采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行分析鉴定.结果 PCR扩增的PvDBPⅡ基因为1.1 kb,重组pET28a-PvDBPⅡ质粒经测序验证,其插入片段序列与GenBank参考序列相似性为99％,转化Ecoli行表达的重组蛋白分子量约为44kDa,且能被间日疟患者血清特异性识别.结论 成功克隆了PvDBPⅡ基因,表达了重组PvDBPⅡ蛋白,为进一步研究基于PvDBPⅡ的红内期间日疟疫苗奠定了基础.

关键词：间日疟原虫、疟疾、Duffy血型结合蛋白、原核表达、疫苗、中国

所属期刊栏目：24

分类号：R382.31(医学寄生虫学)

资助基金：卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室开放课题WK009-001;安徽省高等学校省级自然科学研究重点项目KJ2012A200

在线出版日期：2012-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：474-477