日本血吸虫视黄酸X受体2全长cDNA的克隆及初步分析

摘要：

目的 克隆编码日本血吸虫视黄酸X受体2(SjRXR2)蛋白的全长cDNA,并对其进行初步研究.方法 利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得SjRXR2蛋白全长编码cDNA.利用生物信息学技术,对基因结构进行初步分析.利用实时荧光定量(Real-time) PCR技术对该基因在日本血吸虫不同时期虫体中的转录情况进行分析.应用在线抗体表位预测软件获得SjRXR2配体结合区抗原性较强的一个多肽序列,合成该多肽片段,并免疫小鼠制备抗血清.利用Western blot技术分析该蛋白在日本血吸虫中的表达.结果 采用RACE技术成功获得了SjRXR2蛋白全长编码cDNA,总长度为5 960bp,其完整开放阅读框为4 308 bp,编码1 435个氨基酸,预测分子量为159 kDa.生物信息学分析表明该基因编码的蛋白质序列具有核受体家族2的典型结构域特征,且与曼氏血吸虫RXR2有较高的相似性.Real-time PCR分析表明,该基因在21、42d龄日本血吸虫虫体内有较高的转录水平.Western blot分析表明,小鼠SjRXR2多肽免疫血清可特异性识别日本血吸虫虫体150 kDa蛋白.结论 成功获得了编码SjRXR2蛋白的全长cDNA,并制备了针对该蛋白的特异性多克隆抗体,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.

关键词：日本血吸虫、视黄酸X受体2、cDNA末端快速扩增技术、核受体

所属期刊栏目：24

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金31172315;公益性行业农业科研专项20090303036

在线出版日期：2012-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：440-444