PCR-RFLP单酶切法鉴别赫坎按蚊复合体的研究

摘要：

目的 建立一种新的赫坎按蚊复合体近缘种按蚊基因鉴别技术,应用于现场按蚊样本的鉴别.方法 用分子生物学软件Vector NTI 9.0,对赫坎按蚊复合体的嗜人按蚊、雷氏按蚊、中华按蚊、八代按蚊4个近缘种按蚊rDNA基因的ITS2区段序列进行限制性内切酶酶切位点预测分析,选择特异性内切酶,建立一种能同时鉴别4种近缘种按蚊的聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)单酶切法鉴别技术,并对现场捕获的452只按蚊样本进行基因鉴别.结果 软件预测赫坎按蚊复合体近缘种4种按蚊的rDNA基因的ITS2区段可被限制性内切酶Dde Ⅰ切成大小易于区分的不同片段,PCR-RFLP单酶切实验结果和软件预测结果完全吻合.4个疟疾流行区捕获的452只按蚊样本经PCR-RFLP Dde Ⅰ单酶切法鉴定有20只嗜人按蚊、6只雷氏按蚊、391只中华按蚊、35只八代按蚊,与形态学鉴别结果符合率为93.4％,与PCR-RFLP双酶切法结果符合率为100％.结论 新建立的PCR-RFLP Dde I单酶切法基因鉴别技术可准确鉴别赫坎按蚊复合体,比传统的形态学鉴别更为简便、可靠,适合用于复合媒介地区的媒介监测.

关键词：赫坎按蚊复合体、PCR-RFLP、基因鉴别

所属期刊栏目：24

分类号：R384.1(医学寄生虫学)

资助基金：国家重大科技专项2008ZX10004-011;江苏省卫生厅科研项目H200933

在线出版日期：2012-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：435-439