10.3969/j.issn.1005-6661.2012.02.014
弓形虫表面抗原P35基因片段的表达纯化和抗原性分析
目的 制备具有免疫活性的弓形虫表面抗原P35基因片段的重组蛋白,并对其抗原性进行分析.方法 根据弓形虫RH株表面抗原P35的cDNA序列设计一对引物,利用PCR技术从RH株弓形虫基因组中扩增出P35的基因片段,将其克隆到T载体中,并通过基因测序加以证实;将其亚克隆至原核表达载体pET-KDO中,在大肠杆菌中经IPrG诱导表达.采用免疫印迹法对表达产物进行抗原性分析.结果 从弓形虫RH株基因组中成功扩增到P35目的基因,该基因在原核系统中经诱导表达出分子量约42 000 Da大小的融合蛋白,经免疫印迹实验表明,表达产物具有良好的抗原性,经亲和层析纯化后得到了重组蛋白.结论 运用基因工程技术得到了高纯度并具有良好抗原性的弓形虫重组P35融合蛋白.
刚地弓形虫、P35表面抗原、基因表达、免疫印迹
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R383.24(医学寄生虫学)
深圳大学科研启动基金200822
2012-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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