弓形虫多基因核酸疫苗构建及其免疫保护性研究

摘要：

目的 构建弓形虫多基因核酸疫苗,评价其免疫保护性.方法 PCR扩增热休克蛋白(HSP70)基因片段,克隆到pcDNA3-ROP2-p30重组质粒中,构建pcDNA3-ROP2-p30-HSP70多基因核酸疫苗.采用该疫苗免疫BALB/c小鼠,检测小鼠脾淋巴细胞及全血CD4+、CD8+,血清、脾淋巴细胞培养液中IgG、IgM、IgA和IFN-γ、TNF、IL-2、IL-4、IL-12等,并进行弓形虫攻击感染实验.结果 应用PCR扩增出916 bp HSP70基因片段,成功构建pcDNA3-ROP2-p30-HSP70重组体,其中包含.HSP70 蛋白基因读码框内的完整序列.该弓形虫多基因核酸疫苗能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫,实验组小鼠血清抗体滴度高,CD4+和CD8+均增殖明显,组间差异有统计学意义(FcD4+=45.00,FCD8+=15.01,P均＜0.01);其血清及脾细胞培养液中IFN-γ、IL-2和IL-12含量均明显升高,尤以血清中升高显著.攻击实验结果显示,实验组小鼠存活时间明显延长.结论 pcDNA3-ROP2-p30-HSP70多基因核酸疫苗具有较强的免疫原性,能产生较好的免疫保护作用.

关键词：刚地弓形虫、棒状体蛋白2、表面抗原P30、热休克蛋白70、核酸疫苗

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分类号：R382.5(医学寄生虫学)

资助基金：山东省自然科学基金2009ZRC03083;济宁市科技发展计划济科2009-56-21;山东省医学科学院科研基金2006-08

在线出版日期：2012-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：173-177,182