质谱技术鉴定日本血吸虫可溶性虫卵抗原具有早期诊断价值的蛋白分子

摘要：

目的 采用二维电泳、免疫印迹法和质谱技术鉴定日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)成分中具有早期诊断价值的抗原分子.方法 通过等电聚焦以及十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳对SEA进行二维电泳,将胶上蛋白质斑点转移到硝酸纤维素膜上,再分别与日本血吸虫感染前、后不同时间点的小鼠血清反应,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG 作为二抗,进行免疫印迹试验,寻找SEA中能与血吸虫感染早期血清反应的蛋白斑点.通过高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析鉴定其蛋白成分.结果 对血吸虫感染1、2、6周以及未感染健康小鼠血清识别SEA的二维电泳免疫印迹图谱进行匹配分析发现,SEA中有2个蛋白斑点能被血吸虫感染后1、2、6周小鼠血清识别,另有3个蛋白斑点仅被血吸虫感染后6周小鼠血清识别.经LC-MS/MS鉴定,2个被血吸虫感染早期血清识别的SEA蛋白分子分别为热休克蛋白(HSP70)和葡萄糖调节蛋白(Grp78/Bip).结论 SEA中HSP70和Grp78/Bip可能具有血吸虫感染早期诊断价值.

关键词：日本血吸虫、可溶性虫卵抗原、早期诊断分子、免疫印迹法、二维电泳、质谱

所属期刊栏目：24

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：国家重大科技专项2008ZX10004-011;江苏省卫生厅科技项目H201066;江苏省卫生厅血地寄防项目X201115;江苏省卫生厅预防医学项目YZ201030;江苏省自然科学基金BK2008110;国家自然科学基金30972581;江苏省科技厅公益专项BM2007704;江苏省医学重点人才基金RC2007095

在线出版日期：2012-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：132-136