血吸虫感染小鼠早期诊断抗原的研究

摘要：

目的 对已知的6种日本血吸虫抗原的早期诊断价值进行评价,为研制用于哨鼠早期诊断的免疫试剂提供候选抗原.方法 用日本血吸虫尾蚴感染小鼠,收集感染前及感染后不同时间的小鼠血清.采用重组日本血吸虫中国大陆株23 kDa膜蛋白大亲水性肽段与谷胱甘肽的融合表达蛋白(GST-HD)、可溶性虫卵抗原(SEA)、血吸虫四跨膜蛋白第二亲水基团(TSP2HD)、血吸虫虫卵蛋白(IPSE)、日本血吸虫虫卵毛蚴抗原(SiMP-10)及日本血吸虫信号蛋白(Sj14-3-3)作为诊断抗原,采用酶联免疫吸附试验检测感染血吸虫后不同时间小鼠血清中特异性抗体IgM和IgG水平,通过分析感染后不同时间点抗原特异性抗体水平变化及阳性率,筛选具有血吸虫感染早期诊断价值的抗原分子.采用免疫印迹试验进一步验证其对血吸虫急性感染早期诊断的价值.结果 感染后第18、21、28天,抗GST-HD抗体IgM阳性率分别为60%、70%、100%,特异性IgG阳性率分别为40%、60%、90%;抗SEA抗体IgM阳性率为50%、60%、90%,特异性IgG阳性率为20%、50%、70%;抗TSP2HD抗体IgM阳性率为30%、40%、50%,特异性IgG阳性率为20%、30%、70%;抗IPSE抗体IgM阳性率为20%、30%、50%,特异性IgG阳性率为20%、30%、60%;抗SjMP-10抗体IgM阳性率为10%、20%、20%,特异性IgG阳性率为10%、20%、30%;抗Sj14-3-3抗体IgM阳性率为0、10%、20%,特异性IgG阳性率为0、10%、30%.以GST-HD融合蛋白和SEA为抗原,检测小鼠早期感染血吸虫的敏感性高于Sj14-3-3、IPSE、TSP、MP-10,检测IgM的敏感性高于IgG.免疫印迹试验结果显示,SEA中分子量在73 kDa左右的蛋白条带可被感染后1周小鼠血清所识别,并随着时间推移反应加强.GST-HD最早出现反应的血清是感染后第10天小鼠血清,反应强度在感染后第5周达到最强.结论 重组GST-HD融合蛋白与SEA中分子量约73 kDa的蛋白分子具有血吸虫感染早期诊断价值,免疫印迹试验的敏感性比酶联免疫吸附试验高.

关键词：日本血吸虫病、抗原、特异性抗体IgG、特异性抗体IgM、早期诊断、酶联免疫吸附试验、免疫印迹试验

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分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：国家重大科技专项2008ZX10004-011;江苏省卫生厅项目H200738、H201066;国家自然科学基金30972581;江苏省科技厅公益专项BM2007704;江苏省医学重点人才基金RC2007095;江苏省自然科学基金BK2008110

在线出版日期：2011-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：273-278