抗日本血吸虫单链抗体免疫毒素的构建表达及生物学活性鉴定

摘要：

目的 构建抗日本血吸虫单克隆抗体NP11-4单链抗体和绿脓杆菌外毒素衍生物PE38KDEL的原核融合表达载体,并对其表达产物进行生物学活性鉴定.方法 应用PCR方法体外扩增NP11-4 V_H、V_L、scFv和PE38KDEL基因,经测序后将scFv及PE38KDEL基因通过限制性内切酶双酶切及连接反应,构建原核表达载体pBAD/gIII A-scFvPE38KDEL,转化E.coli Top10F',L-阿拉伯糖诱导表达,表达产物经Western blot及ELISA鉴定其活性.结果 构建了重组免疫毒素表达载体pBAD/gIII A-scFv-PE38KDEL,诱导表达产物主要以包涵体形式存在,分子量约为70 kD;经变性、复性后的重组免疫毒素与血吸虫可溶性虫卵抗原有较好的结合活性.结论 构建及表达了抗日本血吸虫单链抗体免疫毒素,为血吸虫病治疗提供了一条新思路.

关键词：日本血吸虫、scFv、PE38KDEL、重组免疫毒素

所属期刊栏目：22

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2006AA02ZA15

在线出版日期：2011-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：117-121