MNNG诱导对日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的影响

摘要：

目的 观察甲基硝基亚硝基胍(MNNG)诱导后日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)含量的动态变化,探讨MNNG诱导后培养细胞的增殖能力.方法 将日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上,置于含20%小牛血清附加常量抗生素的RPMI-1640常规培养基中培养;培养第4天,细胞随机分为实验组和对照组两组,实验组细胞以含3 g/ml MNNG的常规培养基处珲48 h,对照组细胞则用不含MNNG的常规培养基作相同处理.细胞经彻底清洗后继续以常规培养基培养3周,然后换用含5%小牛血清的低血清培养基培养.MNNG处理后第1～9周,每周实验组和对照组细胞采用略作修改的胶银法进行Ag-NORs染色,光镜下观察与拍照,HPIAS-2000图像分析仪测定代表培养细胞内Ag-NORs含量的吸光度(A)值,并进行统计学分析.结果 培养过程中,对照组细胞着色逐渐变浅,MNNG组细胞除在第2 周时着色变浅外,其余均逐渐加深,尤其在第6周(MNNG诱导后第5周),细胞核呈深棕色,可见粗大的银染颗粒,核仁呈黑色,并观察到分裂细胞.第7～9周,两组细胞着色均逐渐,变浅.定量分析发现,对照组细胞在培养初期Ag-NORs含量最高,随后逐渐降低;MNNG组的Ag-NORs含量在培养第2周时稍有降低,随后逐渐升高;在培养第6周即MNNG诱导后第5周时达到高峰,然后又逐渐下降.结论 MNNG诱导可显著增强培养细胞的rDNA转录活性,提高细胞的分裂增殖能力,在MNNG诱导后第5周细胞增殖能力最强.

关键词：日本血吸虫、培养细胞、相关嗜银蛋白、甲基硝基亚硝基胍

所属期刊栏目：21

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30570243;湖北省卫生厅资助项目JX1B067

在线出版日期：2011-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：378-381,封3