日本血吸虫嗜肌素样蛋白编码基因的克隆表达及其免疫原性研究

摘要：

目的 克隆和表达日本血吸虫嗜肌素样蛋白(SjcMLP)编码基因,并研究其重组抗原的免疫原性.方法 PCR扩增SjcMLP编码基因,并亚克隆入表达载体pQE30.将重组表达质粒pQE30-SjcMLP转入宿主菌E.coli M15,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用金属Ni螯合物亲和层析柱(Ni-NTA)纯化SjcMLP重组蛋白(reSjcMLP).纯化的reSjcMLP采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹试验(Western blot)作进一步分析.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定用reSjcMLP免疫C57BL/6小鼠血清中的抗体水平.结果 SDS-PAGE分析表明获得的重组抗原的大小约24.8 kDa,与预计的融合蛋白大小相符.Western blot显示该重组抗原能被日本血吸虫尾蚴感染兔血清识别.用该重组抗原包被进行ELISA检测,免疫血清滴度高达1:12800.但动物免疫试验结果减虫效果不明显.结论 SjcMLP编码基因以可溶性融合蛋白的形式得到表达,动物免疫试验未诱导出明显的保护力.

关键词：日本血吸虫、嗜肌素样蛋白、克隆、表达、免疫

所属期刊栏目：19

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30371262;国家高技术研究发展计划863计划2006AA02Z444;2004AA215240;2004AA2Z3520;上海市科委资助项目03DZ19231;生物医药重点科技攻关项目064319026

在线出版日期：2007-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：247-251