正交试验法筛选日本血吸虫细胞的培养条件

摘要：

目的筛选日本血吸虫成虫细胞的培养条件及评价细胞培养条件优劣的指标.方法以琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)为指标,运用正交试验法进一步研究合成培养基、细胞外基质和血清浓度3个因素在3个不同水平对虫龄为21 d的日本血吸虫细胞的影响.培养第5天对日本血吸虫培养细胞进行SDH染色;培养第14天分别进行LDH、G-6-PDH染色,Olympus-BH2显微镜观察并拍照,HPIAS-2000图像分析仪测量其含量,用SPSS 10.0作统计分析.结果不论以SDH或LDH,还是G-6-PDH为指标,均显示RPMI-1640含20%小牛血清组成的培养基培养接种于肝基质上的日本血吸虫细胞,培养细胞的SDH、LDH、G-6-PDH活性最强.血清浓度对培养细胞酶活性的影响最大,其次是细胞外基质(ECM),影响最小的是合成培养基.其中,血清浓度对3种酶活性的影响差异均显著;基质对SDH、LDH活性的影响差异显著,而对G-6-PDH活性的影响差异不显著;合成培养基的影响均无差异.结论 RPMI-1640含20%小牛血清组成的培养基培养接种于肝基质上的日本血吸虫细胞,培养细胞的SDH、LDH、G-6-PDH活性最强.选择3种酶中任一,均可用来评价日本血吸虫细胞培养条件的优劣.

关键词：日本血吸虫、细胞培养、正交试验、琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、细胞外基质

所属期刊栏目：17

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：湖北省自然科学基金2000J075;武汉大学校科研和校改项目;武汉大学校科研和教改项目;湖北省血吸虫病专家咨询委员会资助项目

在线出版日期：2005-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：111-115