日本血吸虫保护性抗原模拟表位的筛选及其免疫保护作用的研究

摘要：

目的在前期已建立日本血吸虫感染兔新模型的基础上,用该血清从噬菌体随机12肽库中筛选阳性单克隆噬菌体,并鉴定其诱导小鼠的免疫保护效果.方法通过给感染日本血吸虫家兔注射酚氧化酶抑制剂,抑制其体内日本血吸虫雌虫产卵,建立无虫卵肉芽肿的日本血吸虫感染动物新模型,用其血清筛选出阳性多克隆噬菌体,经与可溶性虫卵抗原(SEA)免疫兔血清充分吸附后,从中随机挑取14个单克隆分别纯化、扩增,用常规ELISA法检测阳性单克隆噬菌体的抗原性;挑选出与新模型兔血清呈强阳性反应,但与SEA免疫兔血清呈阴性或弱阳性反应的单克隆噬菌体,按1×10 15 pfu/次剂量,0-2-4周方案,皮下多点注射免疫小鼠.末次免疫4周后,每鼠经腹部皮肤攻击感染(40±1)条日本血吸虫尾蚴,感染42 d后观察减虫率及减卵率.结果所选14个单克隆噬菌体均能与新模型兔血清和常规感染模型兔血清反应,尤其是第8号和第13号2个克隆与新模型兔血清呈强阳性反应,但与SEA免疫兔血清呈阴性反应;8号、13号单克隆噬菌体及原始噬菌体肽库免疫小鼠后诱导抗攻击感染的减虫率及每克肝脏减卵率分别为35.81%和63.32%、32.09%和52.02%、14.90%和30.64%.结论阳性多克隆噬菌体与SEA免疫兔血清免疫吸附后能去除大部分表达SEA抗原模拟表位的克隆,所选14个单克隆噬菌体均表达了日本血吸虫抗原模拟表位.与阳性多克隆噬菌体及原始噬菌体肽库相比,2个单克隆噬菌体能诱导小鼠产生较高的免疫保护力,其表达的模拟抗原表位有可能作为多价疫苗的候选分子.

关键词：日本血吸虫、抗原表位、单克隆、感染、免疫

所属期刊栏目：17

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：湖北省科技攻关项目2003AA3003B04;湖北省卫生厅科研项目JX1A11

在线出版日期：2005-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：17-20