日本血吸虫23 kDa膜蛋白DNA疫苗保护性免疫及IL-12免疫佐剂作用的研究

摘要：

目的研究日本血吸虫中国大陆株23 kDa膜蛋白(SjC23)DNA疫苗诱导BALB/c小鼠免疫保护作用以及IL-12的免疫增强效果.方法56只BALB/c雌性小鼠随机分为A、B、C、D 4组,每组14只.A组(对照组),于每鼠两腿股四头肌注射100μgpcDNA3.1质粒DNA;B组(SjC 23组),注射100μgpcDNA3.1-SjC 23质粒DNA;C组(SjC 23+IL-12DNA组),注射100μgpcD-NA3.1-SjC 23、100μgpcDNA3.1-p35、100μgpcDNA3.1-p40质粒DNA的混合液;D组(SjC23+rIL-12蛋白组),免疫剂量同SjC23组.共免疫3次,每次免疫间隔2周,剂量和方法同第1次.于末次免疫后1个月,每鼠攻击感染(45±2)条日本血吸虫中国大陆株尾蚴.但D组的小鼠在攻击感染当天,及感染后第2、4、6天经腹腔注射0.2μg/鼠rIL-12蛋白.攻击后45 d剖杀小鼠,计数成虫及肝内虫卵数.于末次免疫后2周对照组及SjC23组用51Cr释放法测定SjC 23介导的特异性细胞毒作用;用脾细胞培养法检测经重组日本血吸虫23 kDa膜蛋白亲水区大片段融合蛋白(GST-HD)刺激后,在免疫后及攻击后小鼠脾细胞IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的水平.分别于攻击前后2周经小鼠尾静脉采血,用ELISA法检测血清中抗SjC 23抗体.结果51Cr释放法测定SjC 23介导的特异性细胞毒作用,SjC 23组获得了56.4%的细胞毒活性,而对照组为25.8%;细胞因子IL-2和IFN-γ的水平在攻击前、后SjC 23组较对照组有明显的升高,而IL-4和IL-10则无变化.ELISA法检测抗SjC 23抗体结果表明,免疫后2周,SjC 23组4/10份血清为阳性,SjC 23+IL-12 DNA组5/10份血清阳性,SjC23+rIL-12蛋白组5/10份血清阳性.动物保护性实验结果显示,与对照组相比,B、C组和D组分别获得了28.1%、40.1%和41.7%的减虫率,减卵率分别为37.9%、53.3%和51. 7%,加用IL-12的C组和D组与单独使用SjC 23的B组相比减虫率和减卵率均显著增加(P＜0.05).结论SjC 23 DNA疫苗具有诱导BALB/c小鼠产生部分抗血吸虫免疫作用,IL-12作为细胞因子佐剂具有提高SjC 23 DNA疫苗免疫保护性的作用.

关键词：日本血吸虫23 kDa膜蛋白DNA疫苗保护性免疫白细胞介素12

所属期刊栏目：13

分类号：R383.2+4(医学寄生虫学)

资助基金：联合国发展计划署UNDP资助项目;江苏省卫生厅科研项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：328-332