10.19556/j.0258-7033.20201111-07
不同年龄水牛成纤维细胞DNA甲基化与组蛋白乙酰化水平分析
实验旨在探讨不同年龄水牛成纤维细胞的增殖能力、DNA甲基化和组蛋白乙酰化水平,为水牛体细胞克隆中供体细胞的选择提供理论依据.利用细胞组织块培养法分离培养3月龄胎儿水牛、新生水牛、10岁龄水牛的耳部成纤维细胞,通过绘制细胞生长曲线、细胞免疫荧光和qRT-PCR方法分析细胞增殖能力和DNA甲基化、组蛋白乙酰化水平.结果表明:随着水牛年龄增长,原代成纤维细胞扩展速度不断下降,P2代细胞的生长曲线呈典型的S型,3月龄胎儿水牛成纤维细胞的增殖能力均高于新生水牛和10岁龄水牛(P<0.05);3月龄胎儿水牛与新生水牛的DNA甲基化水平低于10岁龄水牛(P<0.01),3月龄胎儿水牛成纤维细胞的DNA甲基化转移酶基因DNMT1、DNMT3A低于新生水牛和10岁龄水牛(P<0.01);随着年龄增长,水牛成纤维细胞组蛋白乙酰化转移酶HAT1基因的表达降低(P<0.01),组蛋白去乙酰化酶HDAC1基因的表达升高(P<0.01).以上结果说明,水牛胎儿成纤维细胞处于低DNA甲基化高组蛋白乙酰化状态,可能更适合作为供体细胞用于水牛体细胞克隆研究.
年龄;水牛;成纤维细胞;细胞增殖;DNA甲基化;组蛋白乙酰化
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S823.2(家畜)
国家自然科学基金;广西自然科学基金;南宁市科学研究;技术开发计划
2021-08-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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