绵羊基因表达定量分析内参基因的筛选

摘要：

内参基因在基因表达定量分析中常用于修正基因的表达量,但不同条件下内参基因的表达并不稳定.本实验旨在选出在绵羊不同组织稳定表达的内参基因.选取6月龄广灵大尾羊的皮肤、肾周脂肪、肝脏、背部最长肌组织为实验样本,用实时荧光定量PCR方法分别测定内参基因GAPDH、18S rRNA、B2M、ACTβ、RPLPO、YWHAZ在绵羊各组织内的mRNA丰度,经GeNorm、NormFinder及BestKeeper综合分析内参基因的稳定性.结果表明:在绵羊背部最长肌和肾周脂肪中,3个软件都得出GAPDH表达最稳定;在肝脏中,3个软件都得出RPLPO表达最稳定;在皮肤中,GeNorm和NormFinder均得出18S rRNA表达最稳定,而GeNorm和BestKeeper均得出GAPDH表达最稳定,所以选取18S rRNA或GAPDH作为内参基因;比较4个组织中表达最稳定的基因时,GeNorm和NormFinder软件均得出RPLPO表达最稳定,而BestKeeper分析表明B2M基因稳定性最好,所以选取RPLPO或B2M作为内参基因.

关键词：广灵大尾羊;实时荧光定量PCR;内参基因;表达稳定性

所属期刊栏目：57

分类号：S826.2(家畜)

资助基金：中央引导地方科技发展专项资金山西省科技创新示范项目;山西省重点研发计划项目;山西省农业科学院生物育种工程项目

在线出版日期：2021-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：77-82