10.19556/j.0258-7033.20200306-04
内蒙古绒山羊Wnt10b干扰载体的构建及鉴定
本研究旨在利用内蒙古绒山羊Wnt10b基因构建干扰质粒并转染耳皮肤细胞检测基因表达.以1岁龄内蒙古绒山羊为研究对象,扩增Wnt10b基因CDS序列,连接到pSGU6载体,构成pSGU6-Wnt10b重组质粒,并使用感受态细胞大量扩增提取,所得质粒转染至生长状态良好的内蒙古绒山羊耳皮肤细胞中,提取RNA利用Real Time PCR技术检测细胞中Wnt10b基因表达情况.结果显示:pSGU6-Wnt10b干扰载体经测序鉴定证明构建成功,转染至耳皮肤细胞24 h后出现绿色荧光,并在48 h后荧光强度最高,转染效率达到最大,实验组中Wnt10b mRNA表达量显著低于对照组.
内蒙古绒山羊、耳皮肤细胞、细胞增殖、Wnt10b、质粒构建、脂质体转染、qRT-PCR
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S827.2(家畜)
国家自然科学基金;内蒙古自然基金
2021-05-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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