DNA甲基化抑制因子5-AzaDc对犬卵母细胞体外培养核成熟的影响

摘要：

本实验旨在研究DNA甲基化酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷(5-AzaDc)对犬卵母细胞体外成熟的影响.研究比较添加不同浓度5-AzaDc(1、2μmol/L)处理不同时间(1、2、48、72 h)观察的犬卵母细胞成熟情况,并通过DNA甲基化的免疫荧光染色,观察5-AzaDc对DNA甲基化在犬卵母细胞中的分布情况及趋势变化.结果表明:添加2μmol/L的5-AzaDc处理48 h,所有卵母细胞均脱离GV期,并且与对照组相比显著提高进入GVBD-MⅡ期的比率(28.3％ vs.87.1％);免疫荧光染色结果显示,成熟卵母细胞的DNA甲基化染色位点主要集中在细胞核内,并未在细胞质中出现,DNA甲基化程度显著降低,并使染色质凝集.综上所述,添加2μmol/L的5-AzaDc处理48 h可以通过抑制DNA甲基化水平提高犬卵母细胞体外成熟率,短时间的抑制DNA甲基化水平对犬卵母细胞的减数分裂恢复有积极促进作用.

关键词：犬卵母细胞、体外成熟、5-氮-2-脱氧胞苷、DNA甲基化抑制

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分类号：S829.3(家畜)

资助基金：吉林农业大学科研启动基金201602;吉林农业大学博士后流动站166992;中国博士后科学基金第60批面上资助2016M601393

在线出版日期：2017-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：50-54