应用母体外周血中游离DNA鉴定细毛羊胎儿性别研究

摘要：

本研究针对不同妊娠时期细毛羊进行胎儿性别鉴定工作.首先对外周血浆/血清分别采用加热法和酚-氯仿法提取游离DNA.通过普通PCR扩增雄性性别决定基因(sex determining region Y,SRY)和β-actin检测基因的目的片段.鉴于部分样品未扩增出SRY基因目的片段,设计2对内外引物,运用优化后的巢式PCR体系再次针对SRY目的基因展开特异性扩增.最后对每个妊娠时间段的鉴定结果和实际生产结果进行统计,计算准确率.结果表明:加热法和酚-氯仿法均成功分离提取出妊娠母羊外周血浆/血清中的游离DNA,并扩增出β-actin检测基因片段;SRY阳性样本扩增出了SRY目的基因片段和β-actin检测基因片段,SRY阴性样本只扩增出了β-actin检测基因片段;性别鉴定的平均准确率达到81.25％(19.5/24),SRY基因检出率与妊娠时间的长短呈正比.结论,本研究建立了一种基于外周血游离DNA检测细毛羊胎儿性别的非创伤性且高效低廉的产前诊断技术,但性别鉴定的准确率还有待提高.

关键词：细毛羊、外周血游离DNA、SRY、性别鉴定

所属期刊栏目：52

分类号：S827.2(家畜)

资助基金：国家自然科学基金31360543、31460593;农业部体系项目CARS-40;新疆农业大学产学研联合培养研究生示范基地项目xjaucxy-yjs-20152012

在线出版日期：2017-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：10-14