徐淮山羊PPAR基因克隆及其表达产物亚细胞定位的研究

摘要：

研究旨在克隆徐淮山羊过氧化物酶体激活增殖受体(PPAR)基因的cDNA,并通过EGFP融合蛋白对该基因产物亚细胞水平定位.采用RT-PCR方法克隆徐淮山羊脂肪组织 PPAR 基因 cDNA,并构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的融合表达载体pEGFP-C1-PPAR,聚乙烯亚胺(PEI)介导基因转染 NIH-3T3细胞,48h后荧光倒置显微镜下观察基因表达产物的分布,RT-PCR检测mRNA在体外水平的表达.结果表明:首次成功克隆出徐淮山羊PPAR基因的全序列cDNA,大小为1 428 bp,GenBank登录号为GUO82382;构建了融合表达载体pEGFP-C1-PPAR;RT-PCR检测mRNA表达明显;EGFP-PPAR融合蛋白定位在NIT-3T3细胞质中.体外克隆的徐淮山羊PPAR基因cDNA,在单细胞水平上可表达于细胞质中,结果为进一步研究PPAR的生物学功能奠定基础.

关键词：过氧化氢酶体激活增殖受体、真核表达、NIH-3T3细胞、荧光蛋白、徐淮山羊

所属期刊栏目：47

分类号：S827.2(家畜)

资助基金：转基因生物新品种培育科技重大专项;转基因生物新品种培育科技重大专项

在线出版日期：2012-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：6-10