扬奇青霉α-半乳糖苷酶agl1基因在大肠杆菌中的表达与纯化研究

摘要：

提取扬奇青霉总RNA,反转录合成Cdna,PCR扩增α-半乳糖苷酶agll基因的编码区DNA序列,连接到原核表达载体pET28a(+)的多克隆位点,获得重组表达载体,转化大肠杆菌BL21,通过IPTG诱导获得agll基因的特异性表达.结果表明:8 mol/L尿素变性处理后的重组蛋白,经过Ni2+亲和柱纯化,SDs-PAGE检测该重组蛋白分子量约82 ku,与预测结果相符.纯化的酶蛋白依次经过6、4、2 mol/L和0 m01/L尿素梯度透析复性后,a-半乳糖苷酶酶活为0.4 U/ml.

关键词：扬奇青霉、α-半乳糖苷酶、基因表达、蛋白纯化

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分类号：S816.7(普通畜牧学)

资助基金：动物营养学国家重点实验室自主研究课题2004DA125184团0806;教育部新世纪优秀人才支持计划NCET-07-0807

在线出版日期：2010-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：57-60