不同品种猪肠道拟杆菌属-普雷沃氏菌属群实时荧光定量分析

摘要：

对猪肠道30种细菌的16s rDNA序列进行比对分析,设计拟杆菌属-普雷沃氏茵属荧光定量的特异引物.以多形拟杆菌菌株(CDC1404-A)基因组的DNA为模板,以常规PCR引物扩增16s rDNA靶片断,将PCR产物纯化后作为DNA标准品,将梯度稀释的标准品作模板,建立定量标准曲线.以TaqMan探针建立25μL反应体系,对不同浓度的多形拟杆菌DNA样品进行检测,并以乳酸杆菌、大肠杆菌和双歧杆菌的基因组DNA模板作阴性对照.验证此方法检测拟杆菌属-普雷沃氏菌属的特异性.结果表明:设计的荧光定量引物和探针,仅对拟杆菌和普雷沃氏菌有很强的特异性,该方法的灵敏度可3.73个μL的基因组DNA.将PCR方法用于5月龄长白和太湖猪回肠内容物检测.其拟杆菌属-普雷沃氏菌属的检测结果呈阳性,每克回肠内容物拟杆菌属-普雷沃氏菌属数量的拷贝数对数值太湖猪比长白猪高38.5%(P<0.10),而且发现拟杆菌属-普雷沃氏茵属数量与背膘厚度、脂肪率之间有正相关关系.

关键词：拟杆菌属-普雷沃氏茵属、实时荧光定量PCR(FQ-PcR)、TaqMan探针

所属期刊栏目：45

分类号：S828.1(家畜)

资助基金：国家973计划项目2004CB117503

在线出版日期：2009-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：50-54