禽传染性支气管炎病毒M41株反向遗传株的构建

摘要：

禽传染性支气管炎病毒是目前危害禽养殖业的重大传染病之一.由于病毒基因组大、操作困难,给研究其基因组结构开发有效的疫苗带来了困难.本研究在对IBV M41毒株全基因组序列测序的基础上用DNAStar软件的MapDraw程序分析酶切位点的分布情况,将全基因组分为14段分段扩增.采用Primer6设计含No See'm酶切位点,在5'端引入T7启动子核心序列的引物,分段克隆于PMD19-T载体,通过引入的"No See'm式"Bsa I和BsmB I酶切位点,将亚克隆体外拼接成基因组全长cDNA.再通过5'端引入的T7启动子核心序列对基因组全长cDNA进行体外转录,使用电击的方法将全长转录物转染BHK-21细胞,转染后转入SPF鸡胚培养,鉴定成功获得了IBV M41拯救株.为研究IBV强毒株的致病机理、毒力位点及IBV新型疫苗的研究提供了参考,奠定了基础.

关键词：IBV、M41株、反向遗传

所属期刊栏目：31

分类号：S858.31;R3;Q781

资助基金：国家自然科学基金;现代农业产业技术体系建设专项

在线出版日期：2015-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：62-63