稳定表达Wnt3a基因的猪胰腺干细胞株的建立
Wnt3a是经典Wnt通路上游的一个重要分泌蛋白，Wnt3a蛋白的活化可促进多种细胞的增殖和分裂。为了揭示Wnt3a在猪胰腺干细胞（PSC）增殖及分化中的调控机理，采用RT-PCR从pGKS2P （+）-Wnt3a质粒中扩增出Wnt3a全长片段，将测序正确的Wnt3a连接到带有水母绿色荧光蛋白（AcGFP1）报告基因的真核表达载体pIRES2-AcGFP1中，构建重组质粒。经EcoRⅠ/BamHⅠ酶切鉴定后，用脂质体转染至猪PSC。用抗生素G418筛选3周后获得稳转pIRES2-AcGFP1-Wnt3a的细胞株。荧光显微镜下观察到几乎所有细胞表达绿色荧光蛋白。RT-PCR和Western blot的结果显示，稳转Wnt3a组的猪PSC中Wnt3a mRNA及蛋白表达水平比对照组明显升高。这些结果表明，稳定表达Wnt3a的猪胰腺干细胞株成功建立，为进一步研究Wnt3a在猪PSC增殖及分化中的作用机理提供了基础资料。
胰腺干细胞株、稳定表达、猪胰腺
R394.2;S858.28;R73-36
2014-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共1页
112-112
