10.16431/j.cnki.1671-7236.2023.10.007
谷氨酰胺对肠产毒素性大肠杆菌感染小鼠肠道损伤的保护作用
[目的]探究谷氨酰胺(glutamine,Gln)对肠产毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)感染小鼠肠道损伤的保护作用,为Gln缓解大肠杆菌性肠损伤提供理论依据.[方法]选取健康的SPF级昆明小鼠24只,随机分为3组:对照组(Con)、模型组(ETEC)、Gln干预组(ETEC+Gln).Con和ETEC组小鼠采用灌胃方式每天给予0.2 mL生理盐水,ETEC+Gln组小鼠给予0.2 mL 1%Gln,于试验第7天,ETEC和ETEC+Gln组小鼠采用灌胃方式给予0.2 mL 8.6X109 CFU/mL ETEC K88,试验期10 d.每天对小鼠进行称重;采用HE和PAS染色观察空肠病理变化;采用ELISA法检测血清炎症因子的浓度;采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测空肠炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ)、紧密连接蛋白(Occludin、Claudin-1、ZO-1)、肠上皮细胞增殖(TGF-β1、PCNA、EGF)和凋亡(Bax、Bcl-2)相关指标的mRNA和蛋白表达水平;采用免疫组化检测空肠Toll样受体 4(Toll-like receptor 4,TLR4)和核因子 κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)的蛋白表达情况.[结果]与 Con 组相比,ETEC组小鼠体重显著下降(P<0.05),而Gln处理缓解了体重下降的趋势;ETEC组小鼠脾脏指数显著高于Con和ETEC+Gln组(P<0.05);与ETEC组相比,Gln处理显著提高了小鼠空肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度比值、杯状细胞数量和黏液层厚度(P<0.05).与Con和ETEC+Gln组相比,ETEC组小鼠血清IL-1β和TNF-α含量、D-乳酸(D-lac)浓度、二胺氧化酶(DAO)活性均显著升高(P<0.05);与ETEC组相比,Gln干预显著降低了小鼠空肠 IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ、TLR4、NF-κB p65 和 Bax 的 mRNA 表达水平(P<0.05),显著增加了 小鼠空肠 Occludin、Claudin-1、ZO-1、Bcl-2、PCNA 和 TGF-β1 的 mRNA 和蛋白表达水平(P<0.05).[结论]Gln 干预可通过抑制肠道炎症反应、促进肠道上皮细胞增殖和提高肠上皮细胞紧密连接等缓解ETEC K88感染引起的小鼠肠道损伤.
谷氨酰胺、肠产毒素性大肠杆菌(ETEC)K88、肠道炎症、肠道屏障
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S852.61+2(动物医学(兽医学))
山东省现代农业产业技术体系特种经济动物创新团队岗位科学家专项;国家林业局中央本级专项;山东省双一流奖补资金
2023-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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