基于PI3K/Akt通路探究蒙古羊ADAMTS1基因的作用机制

摘要：

[目的]基于PI3K/Akt通路研究含凝血酶敏感素基序的去解联金属蛋白酶1(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1,ADAMTS1)在产双胎和单胎蒙古羊发情周期不同阶段卵巢内的表达规律,探究ADAMTS1基因影响蒙古羊繁殖性状的作用机制.[方法]选取经产2次的双胎和单胎蒙古羊共40只,自然发情,确定母羊发情期和间情期,分为双胎发情期、双胎间情期、单胎发情期和单胎间情期组,每组各10只羊.利用注射器抽取2～3岁蒙古羊颗粒细胞,分为对照组和试验组,对照组不添加药物,试验组添加15 μmol/L LY294002处理颗粒细胞,分别在24、48和72 h测定细胞活力.通过实时荧光定量PCR技术检测母羊卵巢组织和颗粒细胞内ADAMTS1、PI3K、PTEN、Akt、RPS6、Bcl-2和BAX基因的相对表达量;通过Western blotting技术检测卵巢和颗粒细胞内ADAMTS1、PI3K和Akt蛋白的表达丰度.[结果]实时荧光定量PCR结果显示,双胎发情期组ADAMTS1、Bcl-2基因表达量均显著高于其余各组(P＜0.05);双胎发情期组和双胎间情期组PI3K、Akt和PTEN基因表达量均显著高于单胎发情期组和单胎间情期组(P＜0.05);单胎间情期组RPS6基因表达量显著低于其余各组(P＜0.05);间情期与发情期相比,BAX基因表达显著上调(P＜0.05).Western blotting结果显示,双胎发情期ADAMST1蛋白表达量显著高于其余各组(P＜0.05);双胎组与单胎组相比,PI3K和Akt蛋白均表达上调,其中,双胎发情期和双胎间情期PI3K蛋白表达量均显著高于单胎发情期组和单胎间情期组(P＜0.05),双胎间情期Akt蛋白表达量最高,显著高于其余各组(P＜0.05).与对照组相比,试验组蒙古羊颗粒细胞形态异常,细胞增殖缓慢,且ADAMTS1、PI3K和Akt基因和蛋白的相对表达量均显著降低(P＜0.05).[结论]ADAMTS1、PI3K和Akt基因和蛋白在蒙古羊卵巢和颗粒细胞内的表达趋势一致,呈正向相关关系,证明ADAMTS1基因PI3K/Akt轴在蒙古羊产双胎性状中发挥重要作用.

关键词：蒙古羊、ADAMTS1基因、PI3K/Akt通路、双胎、单胎、发情周期

所属期刊栏目：50

分类号：S814.8(普通畜牧学)

资助基金：内蒙古自治区自然基金项目2020MS03062

在线出版日期：2023-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：3459-3468