鸡PERP1基因功能分析、核心启动子筛选及其转录因子预测

摘要：

[目的]研究TP53凋亡效应因子(PERP1)在卵泡发育中的调控作用及表达机制.[方法]以蛋鸡卵巢组织为材料,克隆蛋鸡PERP1基因CDS区全长序列,并构建PERP1基因过表达载体,通过转染鸡卵泡颗粒细胞,采用实时荧光定量PCR检测转染后PERP1基因,增殖凋亡相关基因BCL2、c-Myc,以及氧化应激相关基因SOD2、CAT的相对表达量.利用3个在线生物信息学分析软件分别预测鸡PERP1基因核心启动子区,并根据预测结果设计6个启动子缺失片段引物,以蛋鸡血液组织为材料,克隆PERP1基因5'-UTR的6个启动子缺失片段并构建重组质粒,并以荧光素酶报告基因试验验证启动子活性区域位置.采用4个转录因子在线预测软件进行启动子活性区转录因子的预测分析.[结果]本研究成功获得鸡PERP1基因的CDS区全长序列并成功构建了 PERP1基因的过表达载体.PERP1基因过表达后,与对照组相比,抗凋亡基因BCL2和促增殖基因c-Myc表达量极显著下调(P＜0.01),抗氧化应激基因CAT和SOD2的相对表达量无显著差异(P＞0.05).生物信息学软件预测和荧光素酶报告载体试验结果表明,PERP1基因核心启动子位于CDS区上游(-441/-71 bp)的位置.转录因子预测结果发现 Sp1、ZEB1、Zic3、c-Jun、AP-2alpha、AP-1、NF-1、c/EBPalp、Adf-1、HNF-3、CACCC-bi、c-Myc 和 Smad4 共13个候选转录因子.[结论]PERP1基因具有促进颗粒细胞凋亡的功能,调控该基因的表达对卵泡发育具有重要意义.

关键词：鸡、PERP1基因、核心启动子、颗粒细胞、转录因子

所属期刊栏目：50

分类号：S831.2;Q78(家禽)

资助基金：湖北省科技重大专项;现代农业产业技术体系

在线出版日期：2023-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：3449-3458