10.16431/j.cnki.1671-7236.2023.08.001
猪RPL36A基因对PK15细胞增殖过程的影响
[目的]探究核糖体蛋白L36A(ribosomal protein L36A,RPL36A)基因对PK15细胞增殖过程的影响,为解析马身猪和大白猪生长速度差异的生理机制奠定基础.[方法]采用脂质体法将RPL36A基因干扰和过表达载体转染至PK15细胞中,通过实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测RPL36A基因表达效率及细胞增殖标志基因(PCNA、Ki67、CyclinB、CDK4)的表达变化,并通过划痕试验、CCK-8和EdU法检测细胞增殖情况.[结果]过表达RPL36A基因后,PK15细胞中PCNA、Ki67,CDK4基因mRNA表达量均极显著升高(P<0.01),CyclinB基因mRNA表达量显著升高(P<0.05);PCNA蛋白表达量显著升高(P<0.05);PK15细胞在48 h的细胞数量极显著高于空载组(P<0.01),细胞增殖速度升高;阳性细胞数极显著升高(P<0.01).干扰RPL36A基因后,PK15细胞中PCNA、CyclinB基因mRNA表达量均极显著降低(P<0.01),Ki67、CDK4基因mRNA表达量均显著降低(P<0.05);PCNA蛋白表达量显著降低(P<0.05);PK15细胞在48 h的细胞数量显著低于对照组(P<0.05),细胞增殖速度降低;阳性细胞数极显著降低(P<0.01).[结论]在PK15细胞中过表达和干扰RPL36A基因后,细胞增殖关键基因PCNA、Ki67、CyclinB、CDK4的表达量及48 h的细胞数量和阳性细胞数均有显著变化,RPL36A基因可影响PK15细胞的增殖过程.
猪、RPL36A基因、PK15细胞、过表达、干扰、细胞增殖
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S828(家畜)
国家级大学生创新创业训练计划项目;三晋学者支持计划;三晋学者支持计划;山西省高等学校科学研究优秀成果培育项目;山西农业大学生物育种工程项目;山西农业大学特优农业高质量发展科技支撑工程
2023-10-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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