胎牛血清在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用研究

摘要：

[目的]研究胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用.[方法]本试验以体外培养第5天的猪孤雌激活囊胚为材料,将新鲜和冷冻囊胚分别在含10％FBS(V/V)的胚胎培养液中继续培养48 h,即分为新鲜组(Fresh)、新鲜+FBS组(Fresh+FBS)、冷冻组(Vitrified)、冷冻+FBS组(Vitrified+FBS).观察各组囊胚的扩张和孵化能力,检测胚胎的细胞膜损伤、凋亡细胞数目、总细胞数目、胞内活性氧(ROS)水平、线粒体活性以及发育相关基因的表达水平.[结果]与Fresh和Vitrified组相比,Fresh+FBS和Vitrified+FBS组的完全扩张率、孵化率和囊胚细胞总数均显著提高(P＜0.05),细胞膜损伤率和细胞凋亡率均显著降低(P＜0.05).与 Fresh 组相比,Vitrified 组 ROS 水平显著升高(P＜0.05),Fresh+FBS 和 Vitrified+FBS 组 ROS 水平均显著降低(P＜0.05).Vitrified+FBS组的线粒体活性显著高于Vitrified组(P＜0.05)、显著低于Fresh+FBS组(P＜0.05),与Fresh组无显著差异(P＞0.05).相比于Fresh组,Vitrified组POU结构域与类转录因子1(POU5F1)表达水平显著上升(P＜0.05)、过氧化氢酶(CAT)表达水平显著下降(P＜0.05).增殖细胞核抗原(PCNA)、DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、BCL2相关X蛋白(BAX)/BCL2L1的表达水平在Fresh和Vitrified组之间均无显著性差异(P＞0.05).Fresh+FBS和Vitrified+FBS组中PCNA、SOD1和CAT的表达水平显著高于Fresh和Vitrified组(P＜0.05).[结论]体外培养第5天的新鲜和冷冻猪孤雌囊胚在10％FBS中继续培养,其发育能力及胚胎质量均得到明显改善.

关键词：猪、囊胚、玻璃化冷冻、胎牛血清、胚胎质量

所属期刊栏目：50

分类号：S828(家畜)

资助基金：云南省基础研究计划重点项目;云南省科技人才与平台计划;国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：606-615