猪圆环病毒Ⅱ型体外诱导3D4/2细胞炎症模型的建立

摘要：

[目的]通过对猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)体外感染3D4/2细胞浓度、时间与细胞炎症水平进行探讨,建立PCV2体外感染3D4/2细胞炎症反应模型,以期为后期药物调控PCV2诱发3D4/2细胞炎症反应的研究奠定基础.[方法]将3D4/2细胞分为对照组及100、10-1、10-2和10-3 PCV2感染组,每组3个重复.对照组用DMEM培养,各PCV2感染组用不同稀释倍数PCV2液培养,2 h后均更换为含5％胎牛血清(FBS)的DMEM维持液进行培养,培养4、8、12和24 h后分别收集细胞及细胞上清液.采用Griess法检测一氧化氮(NO)水平,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧(ROS)水平,酶标法检测还原型谷胱甘肽(GSH)水平,分光光度法检测黄嘌呤氧化酶(XOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性,ELISA法测定白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)、IL-8、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)以及环氧合酶1(COX-1)和COX-2的分泌水平.[结果]100至10-3 PCV2作用4、8、12和24 h均能够成功感染3D4/2细胞.与对照组相比,100 PCV2在感染3D4/2细胞4、8、12、24 h后ROS水平均极显著升高(P＜0.01),10-1至10-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后ROS水平显著或极显著升高(P＜0.05;P＜0.01);100至10-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后,细胞内NO浓度及MPO活性显著提高(P＜0.05),细胞上清液中的IL-1β.IL-6、TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-8和MCP-1水平及COX-1活性均显著或极显著升高(P＜0.05;P＜0.01),其中100 PCV2感染3D4/2细胞后,各炎症因子水平上升最显著,且随着时间的延长,NO浓度逐渐升高,XOD活性逐渐降低.[结论]PCV2可诱导3D4/2细胞炎症反应,且100PCV2体外感染3D4/2细胞4～12 h是建立炎症模型的最佳条件.

关键词：猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)、炎性因子、3D4/2细胞

所属期刊栏目：49

分类号：S858.28(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31960715

在线出版日期：2023-02-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：4920-4927