褐黄血蜱卵蛋白的鉴定及在卵孵化过程中的量变

摘要：

[目的]探明褐黄血蜱卵蛋白成分及其在胚胎发育过程中的作用,为筛选抗蜱生殖疫苗分子奠定基础.[方法]提取褐黄血蜱孵化0、7、14、21 d的卵蛋白,以过滤器辅助样品制备(filter-aided sample preparation,FASP)法酶解卵蛋白,液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)分离、检测酶解特异性肽段,搜索该蜱中肠转录组文库鉴定卵原生质中的蛋白,登录NCBI对各蛋白进行注释;以Maxquant计算各蛋白的 iBAQ(intensity-based absolute quantification)和非标记定量(Label-free quantification,LFQ),分析各蛋白在不同孵化时间的相对丰度及其增减,并对高可信蛋白序列进行GO功能富集分析.[结果]本研究共检出特异性肽段1 044条,由此鉴定多肽291种,其中高可信的(unique peptides≥2)112种,但仅39种有相关文献.基于文献,按照功能将39种蛋白归类于酶、酶抑制剂、转运蛋白、热休克蛋白、细胞骨架蛋白及未知蛋白6类;酶、酶抑制剂、转运蛋白、热休克蛋白都有家族蛋白共存的情况.定量分析显示,在新产褐黄血蜱卵中,丰度最高的是Contig14782,其次为Contig6575.至孵化结束时,在20种高丰度蛋白中,1种(Conitig2242)显著升高(P＜0.05),14种显著下降(P＜0.05),5种增减不显著.GO功能富集分析表明,本次鉴定的高可信蛋白主要定位于胞外区域,参与免疫调节过程,发挥结合蛋白质和RNA的作用.[结论]褐黄血蜱卵蛋白成分复杂、种类众多,包括酶、酶抑制剂、转运蛋白、热休克蛋白、细胞骨架蛋白等,其中酶是最多的一类.在孵化期间,绝大多数蛋白酶和酶抑制剂丰度显著下降.

关键词：褐黄血蜱、卵蛋白、液相色谱-串联质谱、定量分析

所属期刊栏目：49

分类号：S852.74+6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;湖南省重点领域研发计划项目

在线出版日期：2023-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：4410-4419