藏羊MSTN基因克隆、生物信息学及组织表达分析

摘要：

[目的]对藏羊肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因进行克隆和生物信息学分析,检测其在藏羊不同组织中的表达,为探究MSTN基因在藏羊中的生物学功能提供参考.[方法]以藏羊背最长肌组织cDNA为模板,克隆藏羊MSTN基因完整CDS区序列并测序,用SeqMan程序对测序结果进行拼接,并用BLAST在线程序对组装后的序列进行分析鉴定.用生物信息学软件进行相似性比对、系统进化树构建及生物信息学分析,用实时荧光定量PCR检测MSTN基因在藏羊不同组织中的表达量.[结果]藏羊MSTN基因CDS全长为1 128 bp,编码375个氨基酸.藏羊MSTN基因氨基酸序列与绵羊、牦牛、牛、猪、恒河猴、人、黑猩猩、犬、鸡及斑马的相似性依次为 100.0％、93.4％、93.4％、95.2％、94.4％、94.2％、94.4％、93.1％、87.8％和 87.5％;系统进化树分析结果表明,藏羊与绵羊的亲缘关系最近,与斑马和鸡的亲缘关系最远.藏羊MSTN蛋白属于亲水性分泌蛋白,且具有不稳定性,不含跨膜结构,含1个信号肽,存在31个潜在的磷酸化位点、2个N-糖基化修饰位点,主要分布在线粒体和细胞质中;MSTN蛋白二级结构以无规卷曲为主,其次是α-螺旋、延伸链和β-转角;三级结构预测结果与二级结构一致.实时荧光定量PCR结果显示,MSTN基因在藏羊不同组织中均有表达,其中在臂三头肌和半腱肌的表达量显著高于肺脏、下丘脑、心脏、肝脏、十二指肠、瘤胃和肾脏(P＜0.05).[结论]成功克隆了藏羊MSTN基因;该基因在藏羊肌肉中的表达量高于内脏组织.该结果为进一步研究MSTN基因对藏羊肌肉生长发育的调控机制奠定了基础.

关键词：MSTN基因、克隆、生物信息学分析、基因表达

所属期刊栏目：49

分类号：S826.8(家畜)

资助基金：甘肃省农业科学院甘肃省牛羊种质与秸秆饲料化重点实验室开放项目;青海省科技计划项目;青海省昆仑英才;乡村振兴人才项目;甘肃省农业科学院科研条件建设

在线出版日期：2023-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：4307-4317