10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.03.038
miR-188对小鼠乳腺癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响
[目的]探讨microRNA-188-5p(miR-188)在乳腺癌细胞增殖、迁移和凋亡过程中的调控作用,以期为乳腺癌相关治疗药物的研发提供理论依据.[方法]培养小鼠乳腺癌细胞(4T1),建立4T1细胞小鼠移植瘤模型,分离肿瘤组织和瘤旁组织,用实时荧光定量PCR法检测miR-188的表达情况;在4T1细胞中分别转染miR-188的模拟物(miR-188 mimics)、模拟物对照(mimics-NC)、miR-188抑制物(miR-188 inhibitor)及抑制物对照(inhibitor-NC),不转染的细胞为空白对照(Con),用实时荧光定量PCR法检测各组细胞miR-188的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖能力,细胞划痕试验检测细胞的迁移率,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blotting检测细胞相关凋亡蛋白的表达情况.[结果]瘤旁组织中miR-188的相对表达量显著高于肿瘤组织(P<0.05);细胞转染结果表明,与Con组相比,miR-188 mimics组miR-188的相对表达量显著上调(P<0.05),而miR-188 inhibitor组显著下调(P<0.05),mimics-NC、inhibitor-NC组均无显著差异(P>0.05),因此后续试验分别以mimics-NC、inhibitor-NC为miR-188 mimics、miR-188 inhibitor的对照进行分析.细胞增殖和划痕试验结果表明,与mimics-NC组相比,miR-188mimics显著降低4T1细胞的增殖速率和迁移速率(P<0.05);细胞凋亡试验结果显示,与mimics-NC组相比,miR-188 mimics显著促进4T1细胞凋亡(P<0.05);与inhibitor-NC组相比,miR-188 inhibitor显著抑制细胞凋亡(P<0.05);Western blotting结果表明,miR-188 mimics显著降低基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达水平(P<0.05),显著提高聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP1)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和Bcl-2-associatedX蛋白(Bax)的表达、抑制抑凋亡蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)的表达(P<0.05).[结论]miR-188可显著抑制4T1细胞的增殖和迁移,促进4T1细胞凋亡,说明miR-188可以作为抑制乳腺癌进展和转移潜能的肿瘤调节子.
乳腺癌;4T1细胞;miR-188;增殖;凋亡
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Q527(核酸)
上海市高校青年科研骨干培养计划;国家自然科学基金;上海农林职业技术学院校内科研立项
2022-03-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共9页
1153-1161