多黏类芽孢杆菌抗菌肽的分离纯化及特性研究

摘要：

试验旨在分离纯化多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)BLCC1-0402代谢产物中的抗菌肽,为抗菌肽制备及其制品检测提供参考.采用离心、不同分子质量卷式膜超滤浓缩、Superdex peptide 10/300GL凝胶过滤层析对多黏类芽孢杆菌发酵上清液进行逐级分离纯化,对不同时段的收集液做抑菌试验,以大肠杆菌O78标准菌株为指示菌,采用打孔法进行抑菌活性检测,比较评价分步层析效果,以Tricine-SDS-PAGE进行分子质量检测.结果 显示,通过5和3 ku卷式膜超滤获得的3～5 ku组分蛋白质样品抗菌活性较强;对于3～5 ku组分经凝胶过滤层析分离纯化,纯化后的抗菌肽A3抑菌活性最强,经Tricine-SDS-PAGE小分子多肽电泳检测,已达到电泳纯,分子质量为4 ku;抑菌活性检测结果显示,该抗菌肽A3对大肠杆菌O78标准菌株具有较强的抑菌作用.同时,抗菌肽A3表现出较好的耐热性,90～100℃处理15 min,抑菌活性可保持在96％左右;具有较好的酸碱稳定性,在pH 2.0～9.0下,抑菌活性保持在90％以上;经胃蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低20％,胰蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低18％,蛋白酶K对抗菌肽A3的抑菌活性几乎无影响.本研究结果表明,分离得到的抗菌肽A3是一种对大肠杆菌O78具有抑菌活性的新型抗菌肽,具有一定的开发潜力,可为下一步抗菌肽的结构分析、理化特性分析等深入研究提供一定参考依据.

关键词：多黏类芽孢杆菌;抗菌肽;提取;分离纯化;稳定性

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分类号：S816.7(普通畜牧学)

资助基金：国家重点研发计划2017YFD0501006

在线出版日期：2021-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2830-2837