西番莲多糖提取物对猪圆环病毒2型感染RAW264.7细胞氧化应激的影响

摘要：

为研究西番莲多糖提取物(Passi lora edulis polysaccharide extract,PEPE)对猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染RAW264.7细胞氧化应激相关因子的影响,本试验探讨了PEPE对氧化应激的调节作用.在96孔细胞培养板中每孔加入100 μL浓度为1×106个/mL的RAW264.7细胞,分别设细胞对照组、PEPE组(25、50、100、200、400、800和1600μg/mL),分别于培养箱培养24和48 h,用MTT法检测细胞活性,筛选PEPE的药物安全浓度范围.试验分为以下6个组:细胞对照组、病毒组、PEPE高(400 μg/mL)、中(200 μg/mL)、低(100 μg/mL)剂量组及维生素C组,其中细胞对照组加入含10％ FBS的DMEM培养液,其余组加入PCV2病毒液,孵育2h后在PEPE组加入对应浓度的PEPE溶液,VC组加入配制好的VC溶液,细胞对照组和病毒组加入含10％ FBS的DMEM培养液,培养48 h,同样用MTT法检测细胞活性,以研究PEPE对PCV2感染RAW264.7细胞活性的影响.按照上述6个试验组分组,处理同上,将细胞培养12 h,收集样品用于检测氧化应激相关因子水平.用Griess法和DCFH-DA荧光探针分别检测RAW264.7细胞上清中NO含量和细胞内活性氧(ROS)水平、OPT荧光法检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量,化学发光法检测细胞内黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力.结果 显示,PEPE对RAW264.7细胞的安全浓度范围为25～400 μg/mL.PCV2感染RAW264.7细胞后,细胞活性显著降低(P＜0.05),而不同浓度PEPE处理组均能提高细胞活性.RAW264.7细胞被PCV2感染后,细胞分泌NO、ROS水平,GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性显著升高(P＜0.05),感染细胞GSH含量显著降低(P＜0.05);PEPE作用于PCV2感染的RAW264.7细胞,显著降低感染细胞NO、ROS水平、GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性(P＜0.05),100 μg/mL PEPE处理组细胞GSH水平显著升高(P＜0.05).本试验结果表明,PEPE能提高PCV2感染RAW264.7细胞的抗氧化能力,有利于缓解病毒感染所致氧化应激.

关键词：西番莲多糖提取物(PEPE)、猪圆环病毒2型(PCV2)、氧化应激

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分类号：S83.7(家禽)

资助基金：广西壮族自治区研究生教育创新计划;广西创新驱动发展专项资金项目;现代农业产业技术体系建设专项广西创新团队项目

在线出版日期：2021-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2238-2246