鼠伤寒沙门菌cya基因的克隆表达及生物信息学分析

摘要：

研究旨在克隆鼠伤寒沙门菌cya基因并对其进行生物信息学分析.以鼠伤寒沙门菌SL1344株为模板PCR扩增并克隆了鼠伤寒沙门菌cya基因,构建原核表达质粒pET-32a-cya,转化大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG对其进行诱导表达、纯化,同时利用相关的生物信息学软件对其进行生物信息学分析.结果 显示,鼠伤寒沙门菌cya基因大小为1185 bp.经SDS-PAGE和Western blotting分析显示,在原核表达系统中主要以包涵体形式存在,蛋白分子质量大小约为58 ku.生物信息学分析表明,Cya蛋白由394个氨基酸组成,理论分子质量为44.97 ku,分子式为C2026H3146N562O578S11,等电点(pI)为7.01,其中带负电荷残基总数(Asp+ Glu)43个,带正电荷残基总数(Arg+ Lys)42个.Cya蛋白无信号肽与跨膜区,为膜内蛋白,含有4个N-糖基化位点、1个O-糖基化位点、27个磷酸化位点、13个线性B细胞结合位点、11个T细胞结合位点.二级结构中α-螺旋、延伸链、β-转角、无规则卷曲所占比例分别为38.07、19.80％、5.58％和36.55％.本试验结果为进一步研究鼠伤寒沙门菌Cya蛋白的功能及建立以Cya蛋白为抗原的免疫鉴别检测方法奠定了基础.

关键词：鼠伤寒沙门菌、cya基因、原核表达、生物信息学分析

所属期刊栏目：48

分类号：S852.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省自然科学基金182300410078

在线出版日期：2021-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1948-1956