猪链球菌4型GalR蛋白的生物信息学分析及原核表达

摘要：

试验旨在了解猪链球菌4型(Streptococcussuis serotype 4,SS4)转录调控因子GalR蛋白生物学信息并对其进行原核表达.使用相关生物信息学分析网站对SS4 SH1510菌株GalR蛋白进行序列同源性和功能结构域检索,并对信号肽、跨膜区和等电点进行预测;同时,对SS4 SH1510菌株GalR基因进行扩增、原核表达、纯化,并用SDS-PAGE分析重组蛋白的可溶性,用Western blotting鉴定重组蛋白的反应原性.氨基酸序列比对显示,SH1510菌株GalR蛋白与变形链球菌、无乳链球菌、绿脓杆菌、马链球菌兽疫亚种、肺炎链球菌、口腔链球菌及李斯特菌的GalR家族蛋白的氨基酸序列分别具有57％、56％、55％、55％、52％、52％和49％的同源性;结构域检索发现GalR蛋白N-末端具有螺旋-转角-螺旋(helix-turn-helix,HTH)基序的小DNA结合结构域,C-末端具有Ⅰ型周质结合蛋白折叠的调节配体结合域,在这两个功能结构域的中间含有一个约18-氨基酸的连接子;GalR蛋白无信号肽,无跨膜区,等电点为5.10.SDS-PAGE分析显示,GalR蛋白绝大部分表达在上清,分子质量为56 ku;Western blotting鉴定结果显示,His单克隆抗体和粗制SS4多克隆抗体兔血清能特异性识别可溶性GalR蛋白.本研究对GalR蛋白进行了生物信息学分析并成功地表达和纯化了GalR蛋白,为进一步研究GalR蛋白在SS4中的作用奠定了基础.

关键词：猪链球菌4型(SS4)、转录调控因子GalR、生物信息学、原核表达

所属期刊栏目：48

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;江苏现代农业生猪产业技术体系

在线出版日期：2021-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：443-449