牛支原体P48蛋白诱导EBL细胞增殖和凋亡的研究

摘要：

试验旨在研究牛支原体P48蛋白对胎牛肺(embryonic bovine lung,EBL)细胞增殖和凋亡的影响.收集不同时间段、不同浓度P48蛋白与EBL细胞共孵育的样品,通过MTT法检测细胞增殖率;DAPI染核法观察EBL细胞核形态变化;流式细胞技术检测该蛋白诱导EBL细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR检测凋亡标志物的mRNA相对表达变化;Western blotting方法检测Bax和Beclin-1蛋白表达水平.结果 显示:当作用时间为72 h,P48蛋白浓度在10 μg/mL时,对EBL细胞增殖有极显著的抑制作用(P＜0.01),在0.1和0.5 μg/mL时对EBL细胞的增殖的抑制作用不显著(P＞0.05);经蛋白诱导12 h细胞核形态未有明显变化,24 h细胞核形态发生皱缩和凝聚,48和72 h细胞核发生碎裂;凋亡标志基因mRNA表达在2和12 h没有明显提高,在24、48、72 h有显著提高,与作用时间呈正相关,同时凋亡相关蛋白Bax和Beclin-1的表达随之显著提高.流式细胞技术结果显示P48蛋白诱导EBL细胞凋亡率为48.44％.综上表明,牛支原体P48重组蛋白能够抑制EBL细胞的增殖,促进细胞凋亡,为进一步揭示牛支原体的致病机制提供参考依据.

关键词：牛支原体、P48蛋白、EBL细胞、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：47

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：甘肃农业大学人才专项GAU-KYQD-2018-04

在线出版日期：2020-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：3149-3157