禽呼肠孤病毒σB和σC蛋白在昆虫细胞中的共表达

摘要：

本研究旨在获得具有天然构象和活性良好的禽呼肠孤病毒(ARV)dB和σC蛋白,采用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中共表达dB和σC蛋白,并对其活性进行鉴定.根据NCBI数据库中ARV dB和σC基因序列设计引物,将两个基因克隆至pFast-Dual载体,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,筛选获得重组穿梭杆粒.通过转染sf9细胞,筛选到含有σB和σC基因的重组病毒.将重组病毒感染sf9细胞,通过优化接毒量和收获时间等参数,确定最佳表达条件,在sf9细胞中高效共表达σB和σC蛋白.Western blotting和间接免疫荧光(IFA)检测结果表明,成功在sf9细胞中共表达了ARV σB和σC蛋白,并具有很好的生物学活性.本试验结果为开发鉴别诊断试剂以及ARV颗粒疫苗的研究奠定了基础.

关键词：禽呼肠孤病毒(ARV)、σB基因、σC基因、杆状病毒表达系统、sf9细胞

所属期刊栏目：47

分类号：S831.7(家禽)

资助基金：广西自然科学基金项目;广西自然科学基金项目;广西科技基地和人才专项;广西“八桂学者”专项;国家“万人计划”领军人才专项

在线出版日期：2020-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1334-1341