猪肝星状细胞内质网应激模型的建立及对泛素化的影响

摘要：

试验对衣霉素(tunicamycin,TM)处理猪肝星状细胞的浓度和培养时间进行筛选,以期成功构建内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)模型,并在此基础上探究ERS下猪肝星状细胞泛素化的变化.试验采用浓度为0、1、2、5、10和15 μg/mL的TM处理猪肝星状细胞,培养2、4、8、16、24和36h.通过检测细胞抑制率对TM浓度和培养时间进行初筛;通过检测细胞周期及ERS标志基因和蛋白表达对TM浓度和培养时间进行终选,以确定是否成功构建ERS模型,同时,在ERS下检测猪肝星状细胞泛素化相关基因的表达变化.结果 表明:由细胞抑制率检测结果初步确定TM浓度5μg/mL、培养8或24 h后有可能出现ERS.5μg/mL TM在培养8或24 h时,ERS标志基因表达均极显著上调(P＜0.01).在培养8h时,ERS标志蛋白中仅ATF4显著上调(P＜0.05),细胞周期中仅G2/M期细胞比例显著下降(P＜0.05);在培养24 h时,ERS标志蛋白均显著上调(P＜0.05),细胞周期在G1期出现阻滞,并导致S期和G2/M期细胞比例极显著下降(P＜0.01).以上结果说明,5μg/mL TM培养24 h可成功构建细胞ERS模型.在ERS下,细胞泛素化相关基因UBA2和UBE2E的表达均极显著升高(P＜0.01).综上,猪肝星状细胞经5μg/mL TM处理24 h,可成功建立ERS模型,并启动泛素化机制.

关键词：衣霉素、猪肝星状细胞、内质网应激、泛素化

所属期刊栏目：47

分类号：Q256(细胞生理学)

资助基金：国家自然科学基金;中国农业科学院科技创新工程

在线出版日期：2020-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：399-406