山羊ACSS2基因的克隆、序列分析及组织表达研究

摘要：

本研究旨在对山羊乙酰辅酶A合成酶2(acetyl-CoA synthetase 2,ACSS2)基因进行克隆和生物信息学分析,并检测其在山羊不同泌乳时期乳腺组织中的表达量变化.以山羊乳腺组织RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增并克隆山羊ACSS2基因完整CDS区序列,对测序结果进行生物信息学分析,并对ACSS2基因在山羊不同泌乳时期乳腺组织中的表达量进行分析.结果 显示,山羊ACSS2基因CDS区序列长2 106 bp,编码701个氨基酸;山羊ACSS2基因与牛、马、人、犬、猪、小鼠和鸡的同源性分别为97.8％、92.0％、91.3％、91.3％、91.1％、88.1％和73.3％.蛋白理化性质分析结果表明,ACSS2蛋白分子质量为78.72 ku,理论等电点为6.03,属于酸性蛋白;跨膜结构和信号肽分析表明,ACSS2蛋白不含跨膜结构和信号肽;结构域分析表明,该蛋白含有1个乙酰辅酶A合成酶N端结构域.亚细胞定位分析结果表明,该蛋白主要分布在内质网(44.4％)、线粒体(33.3％)、细胞质(11.1％)和细胞核(11.1％)中.蛋白质结构预测发现ACSS2蛋白含有α-螺旋(29.10％)、延伸链(21.54％)、β-转角(9.84％)及无规则卷曲(39.52％).实时荧光定量PCR分析结果表明,ACSS2基因在不同泌乳时期均有表达,其中在泌乳中期表达量最高,在干奶期表达量最低.本试验结果为进一步研究山羊ACSS2基因在脂质代谢过程中的功能及转录调控机制提供了参考.

关键词：山羊、ACSS2基因、克隆、生物信息学分析、表达分析

所属期刊栏目：47

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31702100

在线出版日期：2020-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：336-344