表皮生长因子对绵羊子宫内膜上皮原代细胞增殖的影响

摘要：

通过建立和完善绵羊子宫内膜上皮原代细胞体外培养技术,为研究绵羊母体和孕体之间的相互作用机制建立体外着床模型.采用组织块法分离培养子宫内膜上皮细胞,观察其生长情况,并比较不同表皮生长因子(EGF)浓度对子宫内膜上皮细胞增殖的作用效果.结果 显示,组织块培养1～2 d后,组织周围迁出子宫内膜上皮细胞,长满60 mm培养皿需9～12 d;经差时消化法纯化后,F1代绵羊子宫内膜上皮细胞纯度可达90％以上,表明所获细胞可用于后续试验;F2代细胞在不同浓度EGF(0、12.5、25、50、75、100 ng/mL)下培养144、168 h,经检测在144 h,12.5、25和100 ng/mL浓度下D45nm值极显著高于对照组(P＜0.01),50 ng/mL浓度下显著高于对照组(P＜0.05),在168 h,12.5 ng/mL浓度下显著高于对照组(P＜0.05),因此,在12.5 ng/mL EGF作用下效果最佳;F3代细胞在0、12.5 ng/mL浓度下培养不同时间(24、48、72、96、120、144、168、192、216 h),经检测D450nm值在144 h差异显著(P＜0.05),168 h后差异极显著(P＜0.01).因此,在培养液中添加12.5 ng/mL EGF可以更加高效、快速得到子宫内膜上皮细胞.

关键词：绵羊、子宫内膜上皮细胞、EGF、免疫荧光染色

所属期刊栏目：47

分类号：S814.8(普通畜牧学)

资助基金：2016年度科技创新服务能力建设—科技计划重点项目“牛胚胎源IFNτ及其受体体外调节子宫源Integrin αvβ3差异表达的研究”KZ201610020018

在线出版日期：2020-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：83-89