DDR1基因过表达对水牛乳腺上皮细胞的影响

摘要：

为揭示盘状结构域受体1 (discoidin domain receptor1,DDR1)基因对水牛泌乳性能的影响,本研究构建了水牛DDR1基因真核表达载体,并对其最佳转染时间进行摸索,同时分析DDR1基因过表达对水牛乳腺上皮细胞的影响.琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,载体片段大小与目标载体片段大小一致,均为8.8 kb,测序结果显示其与目的片段序列匹配率为100％.细胞转染试验结果显示,DDR1基因过表达最佳转染时间为48 h.细胞增殖检测结果显示,DDR1基因过表达组与对照组细胞相对荧光值差异不显著(P＞0.05).细胞凋亡检测结果显示,DDR1基因过表达对水牛乳腺上皮细胞的晚期凋亡率(19.87％ VS 17.49)无影响(P＞0.05),但极显著增加了水牛乳腺上皮细胞早期凋亡率(6.48％ VS 1.35％,P＜0.01).同时,DDR1基因过表达上调了水牛乳腺上皮细胞中抑凋亡基因BCL-2和XIAP的表达,而下调了促凋亡基因P53的表达.此外,DDR1基因过表达显著提高了水牛乳腺上皮细胞的迁移率(66.26％ VS58.76％,P＜0.05).综上,试验成功构建了水牛DDR1基因真核表达载体并证明了DDR1基因过表达促进了水牛乳腺上皮细胞的早期凋亡和迁移,为今后进一步研究水牛乳腺发育和泌乳性能提供了一定理论依据.

关键词：DDR1基因、水牛、乳腺上皮细胞

所属期刊栏目：46

分类号：S813.3(普通畜牧学)

资助基金：国家自然科学基金;中央引导地方基金;广西科技重大专项;广西自然科学青年基金

在线出版日期：2020-01-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：3635-3641