NO自由基对猪圆环病毒2型复制的体外抑制作用研究

摘要：

试验旨在探讨NO自由基(NO·)对猪圆环病毒2型(PCV2)复制的抑制作用.硝普钠(SNP)和抗坏血酸(VC)联合加入培养基中可产生NO·,而单独使用SNP产生NO的形式为NO+.本研究采用MTT法测定药物的细胞毒性,通过Griess反应测定供体药物产生NO的水平.分别用SNP、VC、SNP+VC和对照药物乙酰青酶胺(NAP)处理PK-15细胞,6 h后接种1 MOI的PCV2病毒液,72 h后收获培养上清和细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)、Western blotting分析、病毒效价和实时荧光定量PCR试验检测病毒增殖水平.结果显示:SNP、VC和SNP+VC对PK-15细胞的最大安全浓度分别为500、62.5和31.25μmol/L;60μmol/L SNP和30μmol/L SNP+30μmol/L VC两种供体产生的NO量极显著高于非药物处理组和对照药物NAP处理组(P<0.01);与阳性对照组相比,60μmol/L SNP+30μmol/L VC处理组中的PCV2毒价和DNA拷贝数极显著下降(P<0.01),且PCV2 Cap蛋白的表达也受到明显抑制,而SNP和VC单独处理组上述指标无显著变化(P>0.05).以上结果表明,SNP+VC产生的NO·对PCV2增殖有显著抑制作用,SNP产生的NO+不影响PCV2增殖,NO体外抑制PCV2增殖主要是通过NO·实现.

关键词：NO、NO自由基(NO·)、猪圆环病毒2型(PCV2)、抑制

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分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：山东省自然科学基金ZR2016CP08;国家自然科学基金项目31502099、31702272;中国博士后科学基金2015M581755;江苏省博士后科学基金1501161B;江苏省自然科学基金BK2017059

在线出版日期：2019-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：924-930