1株犬副流感病毒的分离鉴定及生物学特性研究

摘要：

试验旨在分离鉴定犬副流感病毒(canine parainfluenza virus,CPIV),并对其生物学特性进行研究.用Ve-ro细胞接种感染CPIV阳性犬肺脏组织,盲传4代,收集72 h病毒液进行RT-PCR鉴定、电镜观察、血凝试验、热敏性试验、紫外照射试验及病毒一步生长曲线的测定,同时扩增N基因进行序列分析,并构建系统进化树.结果显示,试验成功从出现咳嗽、流鼻涕等呼吸系统疾病症状的病犬肺脏中分离出1株CPIV,命名为CPIV-BJ01;RT-PCR扩增结果发现,在534 bp处有特异性目的条带.病毒电镜观察发现,其超微结构呈圆形、有囊膜、直径在80～200 nm之间;血凝试验显示,病毒在4和37℃均能凝集1％猪红细胞,与报道的CPIV血凝特性一致;病毒对热敏感,长时间高温下病毒毒价会随之下降;紫外照射可使病毒在短时间内对细胞的感染性急剧下降.病毒一步生长曲线测定结果显示,在12～48 h病毒高速增殖,细胞培养液中病毒滴度急剧上升,之后趋于稳定.CPIV N基因序列与19株有代表性的副流感病毒N基因相比,其核苷酸序列同源性为97.1％ ～99.8％.遗传进化分析表明,CPIV-BJ01与PIV51168-1(登录号:KC237064.1)和PIV5 ZJQ 221(登录号:KX100034.1)位于同一分支上,亲缘关系较近.

关键词：犬副流感病毒(CPIV)、分离鉴定、生物学特性、进化分析

所属期刊栏目：46

分类号：S852.65+9.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"十三五"重点研发计划"宠物病毒性传染病新型生物治疗制剂研究与产品创制"2016YFD0501003;两种SPF犬病原的抗体检测方法的建立2017YFD0501603;中国农业科学院创新工程项目ASTIP-IAS15

在线出版日期：2019-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：891-897