阿拉善双峰驼ENaCα亚基基因克隆及激素对肾皮质细胞中该基因表达的影响

摘要：

为探究阿拉善双峰驼上皮细胞钠通道的作用特点,试验采用深圳华大公司提供的E N aCα亚基基因片段序列设计PCR引物,提取阿拉善双峰驼肾皮质总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增获得双峰驼ENaCα亚基基因,构建克隆质粒pMD19-T-ENaCα,对重组质粒进行双酶切和测序分析;采集双峰驼肾皮质部分,细胞体外培养到P3代后,加入不同浓度的醛固酮(aldosterone)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ),实时荧光定量PCR技术检测细胞中ENaCα亚基基因的表达情况,以确定ENaCα对两种激素浓度变化的敏感性.结果显示,PCR扩增得到2.2 kb的特异性条带,SmaⅠ和PstⅠ双酶切得到2.2和2.7 kb的条带,表明重组质粒pMD19-T-ENaCα构建成功.实时荧光定量PCR结果显示,1×10-9 mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ处理的双峰驼肾皮质细胞的ENaCα表达量显著高于对照组(P<0.05);1×10-6、1×10-7和1×10-8 mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ表达量显著低于对照组(P<0.05).本研究结果为揭示双峰驼水盐代谢的生理机制提供了试验依据.

关键词：阿拉善双峰驼、上皮细胞钠通道、醛固酮、血管紧张素Ⅱ

所属期刊栏目：46

分类号：S824(家畜)

资助基金：内蒙古自治区自然科学基金项目2016MS0349

在线出版日期：2019-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：338-344